lysate based upon their molecular weight using a positive electrode to attract

負に荷電したタンパク質。 これを行うには、我々は我々の商業的に先に調製したタンパク質サンプルを読み込む 利用可能アクリルアミドゲル。

the negatively charged proteins.

ゲルは、アクリルアミドの一定のパーセンテージまたはグラデーションで利用可能です。より高い アクリルアミドの割合ゲルマトリックスの細孔径が小さい。

To do this we load our previously prepared protein samples into a commercially

したがって、より高い割合のゲルは、低量のタンパク質に対して優れている 大量のタンパク質と勾配ゲルを使用することができるため、低割合ゲルは優れている

available polyacrylamide gel.

細孔径でのさまざまな範囲のためにすべてのサイズのタンパク質。 電気泳動装置に挿入してあなたのゲルを調製し、

Gels are available in fixed percentages or gradients of acrylamide. The higher the

あなたのゲル化学のために適切である、ランニングバッファーを充填。 ランニングバッファーでゲルのウェルをすすぎにバッファを追加

acrylamide percentage the smaller the pore size of gel matrix.

チャンバー。 ウェルにあなたのサンプルをロードします。あなたは金額に不明な場合 負荷は、全タンパク質の10〜30マイクログラムが示唆出発点としてある

Therefore higher percentage gels are better for low weight proteins,

サンプルのほか、緊密な量がロードされます。 また、予め染色分子量のためによく、少なくとも1を確保する必要があります

low percentage gels are better for large weight proteins and gradient gels can be used for

はしご。 はしごは、中にタンパク質の分離を監視することができます 電気泳動し、その後中に試料中のタンパク質の重量を確認する

proteins of all sizes due to their varying range in pore size.

後で分析する。 電気泳動装置を閉じて、電源に接続します。 ほとんどのユニットは通常200ボルトで45〜60分を実行する

Prepare your gel by inserting it into the electrophoresis apparatus and

またはローディングバッファーがゲルの底に到達するまで。 この時間の間に、各試料中の負に帯電したタンパク質は、向かって移行します

filling with running buffer that is appropriate for your gel chemistry.

ポリアクリルアミドを介して自分の道を作って正に帯電電極 ゲルマトリックス。

Rinse the wells of the gel with running buffer and add buffer to the

chambers.

Load your samples into the wells. If you are unsure of the amount to

load, 10-30 micrograms of total protein is a suggested starting point as

well as tighter amount of sample loaded.

You will also need to reserve at least one well for prestained molecular weight

ladder.

The ladder will allow you to monitor protein separation during

electrophoresis and subsequently verify protein weight in your sample during

later analysis.

Close the electrophoresis unit and connect it to a power supply.

Most units typically run 45-60 minutes at 200 volts

or until the loading buffer reaches the bottom of the gel.

During this time the negatively charged proteins in each sample will migrate toward

the positively charged electrode making their way through the polyacrylamide

gel matrix.